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影響ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的因素有哪些

日期:2022-02-11 14:04:26 by
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ELISA試劑盒又被稱為即酶聯(lián)免疫法。上海舒話生物通過(guò)幾年的試驗(yàn),得出主要影響ELISA試驗(yàn)的要素有如下三方面:
 
  一、試劑盒
 
  1、抗原、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)下降或失活,成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對(duì)雜質(zhì)的反響靈敏度也高,試驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽(yáng)性;
    2、酶結(jié)合物濃度過(guò)高,也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高。
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       二、試驗(yàn)儀器
 
  1、加樣器是否通過(guò)校正,酶免測(cè)定血清用血量很少,如手工加樣器的功能不好,吸取樣品不,會(huì)使成果忽高忽低;
 
  2、每次洗板前,應(yīng)查看洗板機(jī)針孔有無(wú)阻塞。
 
  三、ELISA試劑盒操作
 
  1、檢測(cè)前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運(yùn)用,試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏,避免形成試驗(yàn)成果假性下降;
 
  2、加樣時(shí)留意勿觸及包被板底部,避免擦傷包被物使抗體(抗原)掉落而影響試驗(yàn)成果的精確性;
 
  3、洗刷不充分,會(huì)使成果假性增高,過(guò)分洗刷呈假陰性;
 
  4、比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無(wú)異物、無(wú)水汽,特別是冬天板從37℃水浴箱取出時(shí),底部留有水汽,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,水汽或孔內(nèi)氣泡也會(huì)使OD值升高;
 
  5、抗原與抗體反響達(dá)到完全平衡,依賴于溫度與時(shí)刻。溫度高于45℃易引起失活及符號(hào)物掉落,溫度低于4℃,影響反響速度。
 
  由于ELISA試劑盒試驗(yàn)的影響要素較多,我們?cè)趯?shí)踐工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì),避免和排除各種要素的影響,使之得到精確可靠的查驗(yàn)成果。

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